脂質組學產品介紹
脂質組學產品介紹
一、脂質組學:
脂質組學的研究于人類的健康密切相關。目前脂質組學已經成為代謝組學的重要分支之一,而且研究熱度越來越高,尤其在疾病研究領域尤為突出,如代謝紊亂,心血管代謝綜合征、腫瘤、Alzheimer's disease等。此外脂質還參與生長發育、神經信號轉導、光合作用等多種生理過程。
二、脂質的分類:
二、實驗流程:
三、脂質提取方法:
將細胞用600 μL甲醇-水=1:1(V/V)轉移至10 mL 玻璃小瓶中,加20 μL內標(Lyso PC 17:0, 濃度為0.1 mg/mL 甲醇配置),加入600 μL氯仿,超聲破碎;
細胞超聲破碎后的溶液在冰水浴中提取10 min;
將所有液體轉移到LC-MS 進樣小瓶中,4°C靜置30 min;
液體分層,取下層液體(氯仿層) 600 μL,(若未能明顯分層,則需要離心使其分層)轉移到另一高回收率GC-MS進樣小瓶中;真空揮干;
在取完下層溶液的離心管中繼續加入600 μL氯仿-甲醇=2:1(V/V),漩渦震蕩30 s;冰水浴中超聲提取10 min;
4°C靜置30 min后,取下層液體,繼續放入原來的GC-MS小瓶中揮干;
揮干后,GC-MS小瓶中的脂質殘渣用300 μL異丙醇-甲醇=1:1(V/V)復溶(渦旋30 s,超聲3 min),將溶液轉移至1.5 mL的離心管中,12000 rpm,4度,離心15 min 后,取200 μL 上清液裝入帶內襯管的LC-MS進樣小瓶中,用于LC-MS分析;
四、儀器設備:
五、脂質組學分析系統:
代謝物定性檢索軟件:Progenesis QI v2.3 軟件(Nonlinear Dynamics, Newcastle, UK)
多元統計分析:SIMCA-P 14.1(Umetrics, Umea, Sweden)
作圖軟件:R語言
六、脂質組學結果展示:
1、PCA分析圖
2、熱圖
3、相關性圖
4、代謝通路圖:
5、火山圖: